总大肠菌群 | 滤膜法与纸片快速法

2023-12-15 14:11 
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总大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示水中是否有粪便污染。总大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物,粪便内除一般正常细菌外,也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而水中有粪便污染,则可以推测该水存在着肠道致病菌污染的可能性,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。

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图 1 总大肠菌群(来源网络)

目前,用于检测大肠菌群的方法有多管发酵法滤膜法纸片快速法酶底物法等。是小编发现在行业存在将滤膜法和纸片快速法弄混的现象,认为纸片法是不用抽滤的滤膜法,其实这是两个完全不同的检测方法,今天我们来了解一下这两个方法的基本原理、操作步骤及优缺点等。


滤膜法

检测原理

用孔径为 0.45 μm 的微孔滤膜过滤水样后,将滤膜贴在选择性培养基上培养后,能形成典型菌落经革兰氏染色和证实试验,来检测水中总大肠菌群的方法。

检测步骤

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图 2 滤膜法操作步骤


纸片快速法

检测原理

按最大可能数(MPN)法,将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂(溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上,在特定的温度(37℃)培养18-24h,当细菌生长繁殖时,产酸使pH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色,同时,产气过程相应的脱氢酶在适宜的pH范围内,催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有总大肠菌群存在,再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群的浓度值。

检测步骤

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图 3 纸片法操作步骤(目标水样、空白、阴性、阳性均按此步骤)

注意由于饮用水含菌量低,在使用纸片快速法是应培养足够的时间方可得到准确的结论。另外水质样品色度变化会干扰纸片法的阳性纸片判读,随着水质样品色度的增加,可判读的阳性纸片数会逐渐减少。


两种方法比较

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